T4多聚核苷酸激酶(3’磷酸酶活性缺失)
描述:
T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链 DNA 或 RNA)的 5’-羟基末端以及 3’-单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶还具有3’磷酸酶活性,将 3’-磷酸基团从寡核苷酸的 3’磷酸末端、脱氧 3’-单磷酸核苷和脱氧 3’-二磷酸核苷上水解掉。该酶经修饰后,其 3’磷酸酶活性缺失,但仍保留了所有激酶的活性。

应用:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA测序
将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA 的 3´ 端
对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1 单位指 37℃条件下,30 分钟内催化 1nmol 酸不溶性[32P] 掺入所需要的酶量。
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